ISO 7218:2007/Amd 1:2013

INTERNATIONAL ISO
STANDARD 7218
Third edition
2007-08-15
AMENDMENT 1
2013-08-01
Corrected version
2014-04-15


Microbiology of food and animal feeding
stuffs — General requirements and
guidance for microbiological
examinations
AMENDMENT 1
Microbiologie des aliments — Exigences générales et
recommandations
AMENDEMENT 1




Reference number
ISO 7218:2007/Amd.1:2013(E)
©
ISO 2013

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ISO 7218:2007/Amd.1:2013(E)

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ISO 7218:2007/Amd.1:2013(E)
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are described
in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the different types of
ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the editorial rules of the
ISO/IEC Directives, Part 2, www.iso.org/directives.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of any patent
rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or on the ISO list of
patent declarations received, www.iso.org/patents.
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
The committee responsible for this document is ISO//TC 34, Food products, Subcommittee SC 9,
Microbiology.
This corrected version of ISO 7218:2007/Amd.1:2013 incorporates corrected values in Tables C.5, C.6 and
C.7, i.e.
 columns four, five, six, seven and eight of Table C.5,
 columns four, five, six, seven, eight and nine of Table C.6, and
 columns four and nine of Table C.7.

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Microbiology of food and animal feeding stuffs — General
requirements and guidance for microbiological examinations
AMENDMENT 1
Page 1, Clause 2
Delete ISO 8261. This has been superseded by ISO 6887-5 [already included in "ISO 6887 (all parts)"].
Delete the entries numbered "ISO 835 (all parts)", "ISO 8655-1", "ISO/TS 11133 (all parts)", and "ISO 16140"
and insert the following.
ISO 835, Laboratory glassware — Graduated pipettes
ISO 8655 (all parts), Piston-operated volumetric apparatus
ISO 11133, Microbiology of food, animal feed and water — Preparation, production, storage and
performance testing of culture media
ISO 16140-2, Microbiology of food and animal feed — Method validation — Part 2: Protocol for the
validation of alternative (proprietary) methods against a reference method
Pages 6 to 30, Clauses 5 and 6
Delete the existing text and insert the following.
5 Apparatus and equipment
5.1 General
In accordance with good laboratory practice, all apparatus and equipment should be kept clean and in good working
condition. Before use, equipment should be verified as fit for the intended purpose and its performance monitored during
use, where appropriate.
Where necessary, equipment and monitoring devices should be calibrated to traceable national standards, and
recalibration and any necessary intermediate checks performed, and procedures and results documented.
Equipment should be regularly checked and maintained to ensure safety and fitness for use. Equipment should be
monitored according to the working conditions and the accuracy demanded for the results.
The frequency of calibration and verification checks of each item of equipment is, in most cases, not specified
in this International Standard, since it shall be determined by each laboratory, depending on the type of
equipment and on the laboratory’s level of activity, and in accordance with the manufacturer’s instructions. In
a limited number of cases, a frequency has been specified since it was considered to be essential.
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Apparatus and equipment shall be constructed and installed to facilitate operation and to allow for ease of
maintenance, cleaning, decontamination and calibration.
Any measurement uncertainties given in this clause relate to the apparatus and equipment concerned and not
to the whole method of analysis.
Throughout this clause, requirements for accuracy of measuring equipment are given. These are based on the
practical tolerance required to demonstrate suitable control of equipment in routine use. The accuracy stated
is related to the metrological uncertainty of the device (see ISO/IEC Guide 99).
For temperature control equipment, check the stability and homogeneity of the temperature before initial use
and after any repair or modification which might have an effect on the temperature control.
5.2 Protective cabinets
5.2.1 Description
A protective cabinet is a work station with horizontal or vertical laminar airflow to remove dust and other
particles, such as microbes, from the air.
The maximum tolerable number of particles per cubic metre with a size greater than or equal to 0,5 µm
represents the dust-spreading class of a safety cabinet. For cabinets used in food microbiology, the number of
particles shall not exceed 4 000 per cubic metre.
Cabinets for use in food microbiology laboratories are of four types.
a) Class I biosafety cabinets are open-fronted exhaust-protective cabinets that are intended to protect the
operator and the environment but will not protect the product from extraneous contamination. Potentially
infected aerosols will be contained within the cabinet and trapped by impaction on the filter. The filtered
air is normally discharged to the atmosphere; if this is not done, the air shall pass through two high-
efficiency particulate air (HEPA) filters mounted in series. They are not recommended for work with risk
category 3 pathogens because of the difficulties in maintaining and ensuring appropriate operator
protection.
b) Class II biosafety cabinets protect the product, the operator and the environment. They recirculate some
filtered air, exhaust some to the atmosphere and take in replacement air through the working aperture,
thereby providing operator protection. They are suitable for work with risk category 2 and 3 pathogens.
c) Horizontal laminar outflow cabinets protect the work from contamination, but blow any aerosols generated
into the operator’s face. Therefore they are not suitable for handling inoculated cultures or preparation of
tissue culture.
d) Vertical laminar airflow cabinets protect the product by the use of vertical laminar flow of HEPA-filtered air.
They also protect the operator by the use of internally recirculated air. They are particularly suitable for
providing an aseptic environment for handling sterile products and for protecting the operator when
handling powders.
Use protective cabinets for all work involving the handling of pathogens and contaminated powders, if required
by national regulations.
The use of a gas burner or wire incinerator is not recommended in protective cabinets. If it is necessary, the gas burner
should have a small flame so that the airflow is not disturbed. The use of disposable equipment (loops, pipettes, etc.) is a
suitable alternative.
5.2.2 Use
Use protective cabinets that are appropriate for the intended application and environmental conditions in the
laboratory.
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Cabinets should be kept as free of equipment as possible.
Where practicable, place everything needed inside the cabinet before starting work to minimize the number of
arm movements into and out of the working aperture. Position equipment and materials so as to minimize
disturbance to the airflow at the working aperture.
Operators should be adequately trained in the correct use of cabinets to ensure their safety and the integrity of the product
or culture.
5.2.3 Cleaning and disinfection
Clean and disinfect the working area after use with appropriate and non-corrosive disinfectant in accordance
with the manufacturer’s instructions. Regularly examine wire grids protecting prefilters, if they exist, and wipe
clean with a disinfectant-soaked cloth.
For laminar flow cabinets, the filter face should be vacuum cleaned regularly, taking care not to damage the filter
medium.
Safety cabinets should be fumigated before filter changing or servicing.
After cleaning of the cabinets, ultraviolet (UV) lamps may be used for disinfection. UV lamps should be regularly
cleaned and replaced in accordance with the manufacturer’s instructions. If they are used, they should be cleaned
regularly to remove any dust and dirt that may block the germicidal effectiveness of the light. Ultraviolet light intensity
should be checked when the cabinet is recertified to ensure that light emission is according to the manufacturer's
instructions.
See Reference [17].
5.2.4 Maintenance and inspection
The efficiency of a protective cabinet shall be checked by a qualified or certified person on receipt and
thereafter at regular intervals as recommended by the manufacturer, as well as after any repair or modification.
The efficiency should be checked after relocation.
Periodic verification of freedom from any microbial contamination should be carried out by a check of the working
surface and walls of the cabinet.
A periodic verification of the number of airborne microorganisms present should be carried out during operation of the
filters using the usual equipment. For example, expose several open Petri dishes containing a non-selective agar culture
medium (e.g. Plate Count Agar) in each cabinet for 30 min. Other methods may be used.
5.3 Balances and gravimetric diluters
5.3.1 Use and measurement uncertainty
Balances are mainly used for weighing the test portion of the sample to be examined and the components of
the culture media and reagents. In addition, they may be used for carrying out measurements of dilution fluid
volumes by mass.
Gravimetric diluters are electronic instruments consisting of a balance and programmable liquid dispenser and
are used during the preparation of initial sample suspensions; they function by adding diluent to a subsample
at a set ratio. The subsample is then weighed to the tolerance specified in the application, and the diluter set
to dispense sufficient diluent for the ratio required (e.g. 9 to 1 for decimal dilutions). See ISO 6887-1.
A food microbiology laboratory shall be equipped with balances of the required range and measurement
uncertainty for the different products to be weighed.
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Unless otherwise stated, the resolution of the balance should achieve a tolerance of 1 % but shall be sufficient to
achieve a maximum tolerance of 5 % of the mass.
EXAMPLE To weigh 10 g, the balance should be capable of being read to 0,1 g.
To weigh 1 g, the balance should be capable of being read to 0,01 g.
Place the equipment on a stable horizontal surface, adjusted as necessary to ensure that it is level and
protected from vibration and draughts.
5.3.2 Cleaning and disinfection
Equipment should be cleaned and disinfected after use or following spillage during weighing with an appropriate and
non-corrosive disinfectant.
5.3.3 Performance verification and calibration
5.3.3.1 Calibration
Calibration shall be checked across the entire range by a qualified person at a frequency dependent on use.
5.3.3.2 Verification
The performance of the balance system shall be regularly verified during use and after cleaning with check
weights in the range of use by a qualified person.
NOTE Check weights may also be verified immediately after calibration of the balance.
5.4 Homogenizers, blenders and mixers
5.4.1 Description
This equipment is used to prepare the initial suspension from the test sample.
The following apparatus may be used:
 a peristaltic blender with sterile bags, possibly with a device for adjusting speed and time; or
NOTE The Stomacher® is an example of a suitable product available commercially. This information is given for the
convenience of users of this document and does not constitute an endorsement by ISO of this product.
 a rotary homogenizer (blender), the notional speed of which is between 8 000 r/min and 45 000 r/min inclusive, with
sterilizable bowls equipped with covers; or
 a vibrational mixer with sterile bags; or
NOTE The Pulsifier® is an example of a suitable product available commercially. This information is given for the
convenience of users of this document and does not constitute an endorsement by ISO of this product.
 another homogenizing system with equivalent efficiency.
In certain cases, manual mixing may be carried out using sterile glass beads having an appropriate diameter
(approximately 6 mm; see ISO 6887-2 to ISO 6887-5).
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5.4.2 Use
The usual operating time of a peristaltic homogenizer is 1 min to 3 min (see ISO 6887-2 to 6887-5 for specific
foods).
Do not use this type of apparatus for certain foodstuffs, such as:
 products which risk puncturing the bag (presence of sharp, hard or dry particles);
 products which are difficult to homogenize because of their texture (e.g. salami-type sausage).
The rotary homogenizer shall operate for a duration such that the total number of revolutions is
between 15 000 r/min and 20 000 r/min inclusive. Even with the slowest homogenizer, this time shall not
exceed 2,5 min.
The vibrational mixer may be used for most foodstuffs, including hard or dry products. The usual operating time
is 0,5 min to 1 min. If microorganisms are likely to be encountered deep inside cohesive structures, the sample should be
cut into small pieces prior to processing.
Glass beads can be used for the preparation, by shaking, of the initial suspensions of certain viscous or thick products, in
particular certain dairy products (see specific standards).
5.4.3 Cleaning and disinfection
Clean and disinfect peristaltic homogenizers and vibrational mixers regularly and after any bag spillage or
leakage.
For rotary homogenizers, clean and sterilize the glass or metal bowl after each use.
5.4.4 Maintenance
Inspect and maintain equipment in accordance with the manufacturer’s instructions.
5.5 pH meter
5.5.1 Description
A pH meter is used to measure the potential difference, at a determined temperature, between a measuring
electrode and a reference one, both electrodes being introduced into the product. It shall be capable of being
read to the nearest 0,01 pH unit, enabling measurements to be made with a tolerance of ±0,1 pH unit. The pH
meter shall be equipped with either manual or automatic temperature compensation.
NOTE The measuring electrode and the reference electrode are usually grouped together in a combined electrode system.
5.5.2 Use
A pH meter is used to measure the pH value of culture media and reagents to check if adjustment is needed
during preparation and as a quality check after sterilization.
It may also be used to measure the pH value of samples and sample suspensions. The use of a pH meter is discussed in
the standard specific to the product to be analysed, in which the conditions for the determination of the pH value and for
adjustment of the pH value are specified.
Adjust the pH meter as indicated in the manufacturer’s manual to measure the pH value at a standardized
temperature, e.g. 25 °C. Read the pH value after stabilization has been reached. Record the value to two
decimal places.
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NOTE The reading may be considered stable when the pH value measured over a period of 5 s varies by not more than 0,02 pH
units. Using electrodes in good condition, equilibrium is normally achieved within 30 s.
5.5.3 Calibration and verification
5.5.3.1 Calibration
Calibrate the pH meter in accordance with the manufacturer’s instructions, using at least two, and preferably
three, standard buffer solutions at least daily before use. Define the maximum permissible tolerances for these
readings, which shall be more stringent than the tolerance permitted in general use.
The standard solutions should be traceable and shall have pH values specified to two decimal places at the
measurement temperature (in general, pH 7,00 and pH 4,00 and/or pH 9,00 at 25 °C, in accordance with the
manufacturer’s instructions). The standards used shall encompass the pH value to be measured.
5.5.3.2 Verification
After calibration of the pH meter with the two traceable standard buffer solutions, a third buffer standard solution should
be used to perform a check reading (in “read” mode) to demonstrate the functionality of the pH meter.
If readings fall outside the maximum permissible limits adjust the pH meter in accordance with the
manufacturer’s instructions. This adjustment shall be followed by further calibration and check.
5.5.4 Maintenance
Check and maintain the electrodes in accordance with the manufacturer’s instructions. It is necessary, in
particular, to monitor regularly
 the condition of the electrodes with respect to ageing and soiling; and
 the response time and stability.
Rinse the electrodes with distilled or deionized water after each use. In order to take into account the soiling
and ageing of the electrodes, regularly clean them more thoroughly in accordance with the manufacturer’s
instructions.
Store the electrodes in accordance with the manufacturer’s instructions.
5.6 Autoclave
5.6.1 Description
An autoclave enables a saturated steam temperature to be attained in the chamber.
The autoclave should be equipped with
 at least one safety valve;
 a drain cock;
 a regulation device allowing the temperature in the chamber to be maintained to within 3 °C of the target
temperature (to take into account the measurement uncertainty associated with the measuring thermocouple); and
 a temperature probe or a recording thermocouple.
It should also be equipped with a timer and temperature recorder.
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5.6.2 Use
With steam sterilization, all air is expelled prior to the pressure build-up. If the autoclave is not fitted with an
automatic evacuation device, it is necessary to remove the air until a continuous jet of steam is emitted.
For the sterilization of culture media, the saturated steam in the chamber shall be at a temperature of at least
121 °C ± 3 °C or temperature specified by manufacturers or production instructions or specified in the test
method.
For the destruction of cultured microorganisms and decontamination of used culture media, the saturated
steam in the chamber shall be at a temperature of at least 121 °C ± 3 °C.
During the same sterilization cycle, do not use the autoclave to sterilize clean equipment (and/or culture
media) and at the same time to decontaminate used equipment (and/or used culture media).
It is preferable to use separate autoclaves for these two processes. After autoclaving, all materials and equipment should
be allowed to cool within the autoclave before removal.
For safety reasons, do not remove the contents until the temperature has dropped below approximately 80 °C.
5.6.3 Maintenance
Clean the chamber, drain filter and door seals regularly. Check the door seals for integrity. Carry out draining
operations and descaling, if necessary, at regular intervals. Follow the manufacturer’s recommendations.
5.6.4 Verification
The autoclave shall be kept in good operating condition and shall be regularly inspected by competent
qualified personnel in accordance with the manufacturer’s instructions.
Keep the monitoring instruments in good working order and verify them by calibration and regular checks.
Initial validation should include performance studies for each operating cycle and each load configuration used in
practice. This process should be repeated after significant repair or modification. Sufficient temperature sensors should
be positioned within the load to demonstrate adequate heat penetration at all locations. Validation and revalidation should
consider the suitability of heat-up and cool-down times as well as the sterilization temperature.
For each load, as a minimum, a process indicator should be included at the centre of the load to verify the heating process
where a traceable record of process efficiency is not available.
5.7 Media preparator
5.7.1 Description
A media preparator is principally designed for the sterilization of large volumes of media (1 l). It consists of a
heating vessel, water jacket and continuous stirring device. The equipment shall also be fitted with a
temperature gauge, pressure gauge, timer and safety valve.
In addition, the unit should have a safety lock to prevent opening until a temperature of <80 °C is reached.
5.7.2 Use
Follow the manufacturer’s instructions at all times.
The entire production process takes place within the apparatus. After addition of all the ingredients, they are
dissolved by stirring and heating. This is followed by sterilization.
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5.7.3 Maintenance
Wash the preparator and rinse thoroughly with purified water between each media batch.
5.7.4 Verification
The preparator shall be kept in good working condition and inspected regularly by competent qualified
personnel in accordance with the manufacturer’s instructions.
Keep the monitoring instruments in good working order and verify them by calibration and regular checks.
Initial validation should include performance studies for each operating cycle and each load size used in practice. This
process should be repeated after significant repair or modification. Two temperature probes, one adjacent to the control
probe and another remote from it, may be used to demonstrate uniform heating.
The temperature and duration of each cycle should be checked.
5.8 Incubator
5.8.1 Description
An incubator consists of an insulated chamber which enables the temperature to be kept stable and uniformly
distributed to within the maximum permissible temperature tolerance specified in the test method.
5.8.2 Use
Incubators shall be equipped with a regulation system that allows the temperature or other parameters to be
kept even and stable over their entire working volume. Define the working volume to ensure that this is
achieved.
If the ambient temperature is close to or higher than that of the incubator, it is necessary to fit a cooling
system to the chamber.
The walls of incubators should be protected from sunlight.
If possible, incubators should not be completely filled in a single operation because the culture media will take a long
time to come to temperature equilibrium, whatever type of incubator is used (forced-air convection or otherwise). Refrain
from leaving the incubator door open for long periods.
When loading incubators, attention should be paid to air circulation (see 10.2.5).
5.8.3 Cleaning and sanitization
Clean and sanitize regularly the inner and outer walls of the incubator and, if appropriate, remove dust from
the ventilation system.
5.8.4 Verification
Check the temperature stability and the homogeneity of the temperature distribution at the working
temperature(s) throughout the working volume of the incubator through simultaneous use of a number of
thermometers or thermocouples of known accuracy and appropriate temperature range.
Use the information to define the acceptable operating range of the incubator and the optimum position of the
thermometer or recording thermocouple used to monitor working temperatures.
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For example, to achieve a target temperature of (37 ± 1) °C when the profiling data shows a range of 36,8 °C to 37,3 °C
across the incubator, then the operating range should be reduced to 36,2 °C to 37,7 °C in order to ensure all parts of the
incubator achieve the target temperature of 37 °C.
This process should be repeated after each significant repair or modification.
The temperature of operation should be checked with one or more maximum and minimum thermometers or recording
thermocouples, for example.
Check the incubator temperature at least every working day. For this purpose, each incubator shall
incorporate at least one working measurement device, which can be immersed in glycerol (or other appropriate heat
sink). Other checking systems of equivalent performance may be used.
5.9 Refrigerator, cold-storage room
5.9.1 Description
These are chambers which allow maintenance of cold storage. For the conservation of food samples for
analysis, the temperature shall be (3 2) °C (maximum permissible tolerances), except for particular
applications. For other uses, the temperature, unless otherwise specified, shall be (5 3) °C.
5.9.2 Use
In order to avoid cross-contamination, use different chambers, or at least different containers, to achieve
physical separation, for the storage of
 uninoculated culture media and reagents;
 test samples; and
 microorganism cultures and incubated media.
Load refrigerators, chillers and cold-storage rooms in such a way that appropriate air circulation is maintained
and the potential for cross-contamination is minimized.
5.9.3 Verification
Check the temperature of each chamber each working day using a thermometer or a permanently installed
probe. The accuracy required of the temperature-monitoring device is dependent on the purpose for which the
unit is used.
5.9.4 Maintenance and cleaning
Carry out the following maintenance operations at regular intervals to ensure proper operation:
 removal of dust from the motor blades or from the external heat-exchange plates;
 defrosting;
 cleaning and sanitization of the inside of the chambers.
5.10 Freezer and deep freezer
5.10.1 Description
A freezer is a chamber which allows frozen storage to be guaranteed. The temperature, unless otherwise
specified, shall be below −15 °C, preferably below −18 °C for food samples.
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A deep freezer is a chamber which allows deep-frozen storage to be guaranteed. The temperature, unless
otherwise specified, shall be below 70 °C.
5.10.2 Use
5.10.2.1 Freezer
Different chambers, or at least different containers, shall be available to achieve physical separation for the
storage of
 uninoculated reagents;
 samples for analysis; and
 microorganism cultures.
Load the freezer in such a way that a sufficiently low temperature is maintained, in particular when unfrozen
products are introduced.
5.10.2.2 Deep freezer
The principle use is storage of microorganisms, reference and/or working cultures, and reagents.
Load the freezer in such a way that a sufficiently low temperature is maintained and cross-contamination
between microorganisms and reagents is prevented.
5.10.3 Verification
Check the temperature of each chamber regularly using a suitable temperature-monitoring device.
5.10.4 Maintenance
Carry out regularly the following maintenance operations:
 removal of dust from the motor blades and from the external heat-exchange plates (if accessible);
 defrosting;
 cleaning and sanitization of the inside of the chambers.
5.11 Thermostatically controlled bath
5.11.1 Description
A thermostatically controlled bath, filled with a liquid (water, ethylene glycol, etc.), with or without a fitted lid or
other device to limit evaporation, is required to maintain a specified temperature. Temperature control is often
more precise than an air incubator, enabling maximum permissible tolerance of 0,5 °C or better to be
achieved. The working temperatures and required maximum permissible tolerance are stipulated in each
individual application or standard method. A cooling system is necessary to maintain a temperature
...

DRAFT AMENDMENT ISO 7218:2007/DAM 1
ISO/TC 34/SC 9 Secretariat: AFNOR
Voting begins on Voting terminates on

2011-10-13 2012-03-13
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION    МЕЖДУНАРОДНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ    ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION


Microbiology of food and animal feeding stuffs — General
requirements and guidance for microbiological examinations
AMENDMENT 1
Microbiologie des aliments — Exigences générales et recommandations
AMENDEMENT 1
ICS 07.100.30









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This draft has been developed within the International Organization for Standardization (ISO), and
processed under the ISO-lead mode of collaboration as defined in the Vienna Agreement.
This draft is hereby submitted to the ISO member bodies and to the CEN member bodies for a parallel
five-month enquiry.
Should this draft be accepted, a final draft, established on the basis of comments received, will be
submitted to a parallel two-month approval vote in ISO and formal vote in CEN.

In accordance with the provisions of Council Resolution 15/1993 this document is circulated in
the English language only.
Conformément aux dispositions de la Résolution du Conseil 15/1993, ce document est distribué
en version anglaise seulement.

To expedite distribution, this document is circulated as received from the committee
secretariat. ISO Central Secretariat work of editing and text composition will be undertaken at
publication stage.
Pour accélérer la distribution, le présent document est distribué tel qu'il est parvenu du
secrétariat du comité. Le travail de rédaction et de composition de texte sera effectué au
Secrétariat central de l'ISO au stade de publication.

THIS DOCUMENT IS A DRAFT CIRCULATED FOR COMMENT AND APPROVAL. IT IS THEREFORE SUBJECT TO CHANGE AND MAY NOT BE
REFERRED TO AS AN INTERNATIONAL STANDARD UNTIL PUBLISHED AS SUCH.
IN ADDITION TO THEIR EVALUATION AS BEING ACCEPTABLE FOR INDUSTRIAL, TECHNOLOGICAL, COMMERCIAL AND USER PURPOSES,
DRAFT INTERNATIONAL STANDARDS MAY ON OCCASION HAVE TO BE CONSIDERED IN THE LIGHT OF THEIR POTENTIAL TO BECOME
STANDARDS TO WHICH REFERENCE MAY BE MADE IN NATIONAL REGULATIONS.
RECIPIENTS OF THIS DRAFT ARE INVITED TO SUBMIT, WITH THEIR COMMENTS, NOTIFICATION OF ANY RELEVANT PATENT RIGHTS OF WHICH
THEY ARE AWARE AND TO PROVIDE SUPPORTING DOCUMENTATION.
©  International Organization for Standardization, 2011

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This ISO document is a Draft International Standard and is copyright-protected by ISO. Except as permitted
under the applicable laws of the user’s country, neither this ISO draft nor any extract from it may be
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Contents Page
Foreword .vii
5 Apparatus and equipment .1
5.1 General .1
5.2 Protective cabinets.1
5.2.1 Description.1
5.2.2 Use .2
5.2.3 Cleaning and disinfection.2
5.2.4 Maintenance and inspection .3
5.3 Balances and gravimetric diluters.3
5.3.1 Use and measurement uncertainty.3
5.3.2 Cleaning and disinfection.3
5.3.3 Performance verification and calibration.3
5.4 Homogenizers, blenders and mixers.4
5.4.1 Description.4
5.4.2 Use .4
5.4.3 Cleaning and disinfection.4
5.4.4 Maintenance.4
5.5 pH meter .5
5.5.1 Description.5
5.5.2 Use .5
5.5.3 Verification .6
5.5.4 Maintenance.6
5.6 Autoclave .6
5.6.1 Description.6
5.6.2 Use .7
5.6.3 Maintenance.7
5.6.4 Verification .7
5.7 Media preparator .7
5.7.1 Description.7
5.7.2 Use .7
5.7.3 Maintenance.7
5.7.4 Verification .8
5.8 Incubator .8
5.8.1 Description.8
5.8.2 Use .8
5.8.3 Cleaning and sanitization .8
5.8.4 Verification .8
5.9 Refrigerator, cold-storage room .9
5.9.1 Description.9
5.9.2 Use .9
5.9.3 Verification .9
5.9.4 Maintenance and cleaning.9
5.10 Freezer and deep freezer .9
5.10.1 Description.9
5.10.2 Use.10
5.10.3 Verification .10
5.10.4 Maintenance.10
5.11 Thermostatically controlled bath.10
5.11.1 Description.10
5.11.2 Use.11
5.11.3 Verification .11
5.11.4 Maintenance.11
© ISO 2011 – All rights reserved iii

---------------------- Page: 3 ----------------------
ISO 7218:2007/DAM 1
5.12 Steamers, including boiling-water baths . 12
5.12.1 Description . 12
5.12.2 Use. 12
5.12.3 Maintenance. 12
5.13 Sterilizing oven . 12
5.13.1 Description . 12
5.13.2 Use. 12
5.13.3 Verification . 13
5.13.4 Maintenance. 13
5.14 Microwave oven . 13
5.14.1 Description . 13
5.14.2 Use. 13
5.14.3 Verification . 13
5.14.4 Maintenance. 13
5.15 Glass washer. 14
5.15.1 Description . 14
5.15.2 Use. 14
5.15.3 Verification . 14
5.15.4 Maintenance. 14
5.16 Optical microscope. 14
5.16.1 Description . 14
5.16.2 Use. 14
5.16.3 Maintenance. 14
5.17 Gas burner or wire incinerator . 15
5.17.1 Description . 15
5.17.2 Use. 15
5.17.3 Maintenance. 15
5.18 Dispenser for culture media and reagents. 15
5.18.1 Description . 15
5.18.2 Use. 15
5.18.3 Verification . 15
5.18.4 Cleaning and maintenance . 16
5.19 Vortex mixer . 16
5.19.1 Description . 16
5.19.2 Use. 16
5.19.3 Verification . 16
5.19.4 Maintenance. 16
5.20 Colony-counting device . 16
5.20.1 Description . 16
5.20.2 Use. 16
5.20.3 Verification . 17
5.20.4 Maintenance. 17
5.21 Equipment for culture in a modified atmosphere. 17
5.21.1 Description . 17
5.21.2 Use. 17
5.21.3 Verification . 17
5.21.4 Maintenance. 17
5.22 Centrifuge. 17
5.22.1 Description . 17
5.22.2 Use. 18
5.22.3 Verification . 18
5.22.4 Maintenance. 18
5.23 Hotplate and heating mantle. 18
5.23.1 Description . 18
5.23.2 Use. 18
5.23.3 Maintenance. 18
5.24 Spiral plater . 18
5.24.1 Description . 18
5.24.2 Use. 18
5.24.3 Verification . 19
iv © ISO 2011 – All rights reserved

---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 7218:2007/DAM 1
5.24.4 Maintenance.19
5.25 Stills, deionizers and reverse-osmosis units .19
5.25.1 Description.19
5.25.2 Use.19
5.25.3 Verification .19
5.25.4 Maintenance.20
5.26 Timers and timing devices .20
5.26.1 Description.20
5.26.2 Use.20
5.26.3 Verification .20
5.26.4 Maintenance.20
5.27 Pipettes and pipettors.20
5.27.1 Description.20
5.27.2 Use.20
5.27.3 Verification .21
5.27.4 Maintenance.21
5.28 Thermometers and temperature-monitoring devices, including automatic recorders.21
5.28.1 Description.21
5.28.2 Use.21
5.28.3 Verification .22
5.28.4 Maintenance.22
5.29 Immunomagnetic separator .22
5.29.1 Description.22
5.29.2 Use and verification .23
5.29.3 Maintenance.23
5.30 Filtration system.23
5.31 Other equipment and software .23
6 Preparation of glassware and other laboratory materials.23
6.1 Preparation.23
6.2 Sterilization/decontamination .23
6.2.1 General .23
6.2.2 Sterilization by dry heat.23
6.2.3 Sterilization by moist heat (steam).24
6.2.4 Decontamination with chemical compounds .24
6.3 Disposable equipment and materials.24
6.4 Storage of clean glassware and materials.24
6.5 Management of sterile glassware and materials.24
6.6 Use of decontamination and disinfection.24
6.6.1 Decontamination of disposable equipment.24
6.6.2 Decontamination of glassware and materials prior to use .24
6.6.3 Decontamination of glassware and materials after use.24
6.7 Waste management.25
6.8 Washing.25
10 Enumeration.26
10.1 General.26
10.2 Enumeration using a solid medium.27
10.2.1 General.27
10.2.2 Number of Petri dishes per dilution .27
10.2.3 Pour plate techniques.27
10.2.4 Surface inoculation .28
10.2.5 Incubation .29
10.3 Calculation and expression of results obtained with solid media .30
10.3.1 Counting of colonies.30
10.3.2 Expression of results.30
10.4 Enumeration of yeasts and moulds.38
10.4.1 General.38
10.4.2 Counting of colo
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 7218
Troisième édition
2007-08-15
AMENDEMENT 1
2013-08-01
Version corrigée
2014-04-15



Microbiologie des aliments — Exigences
générales et recommandations
AMENDEMENT 1
Microbiology of food and animal feeding stuffs — General requirements
and guidance for microbiological examinations
AMENDMENT 1




Numéro de référence
ISO 7218:2007/Amd.1:2013(F)
©
ISO 2013

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ISO 7218:2007/Amd.1:2013(F)

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Publié en Suisse

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ISO 7218:2007/Amd.1:2013(F)
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont décrites
dans les Directives ISO/CEI, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents critères
d'approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été rédigé
conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/CEI, Partie 2, www.iso.org/directives.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant les références
aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de l'élaboration du document
sont indiqués dans l'Introduction et/ou sur la liste ISO des déclarations de brevets
reçues, www.iso.org/brevets.
Les éventuelles appellations commerciales utilisées dans le présent document sont données pour information
à l'intention des utilisateurs et ne constituent pas une approbation ou une recommandation.
Le comité chargé de l'élaboration du présent document est l'ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité
SC 9, Microbiologie.
La présente version corrigée de l'ISO 7218:2007/Amd.1:2013 inclut la correction des valeurs dans les
Tableaux C.5, C.6 et C.7, c'est à dire les
 colonnes quatre, cinq, six, sept et huit du Table C.5,
 colonnes quatre, cinq, six, sept, hut et neuf du Tableau C.6, et
 colonnes quatre et neuf du Tableau C.7.

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ISO 7218:2007/Amd.1:2013(F)

Microbiologie des aliments — Exigences générales et
recommandations
AMENDEMENT 1
Pages 1 et 2, Article 2
Supprimer l'ISO 8261. Elle a été remplacée par l'ISO 6887-5 [déjà incluse dans «ISO 6887 (toutes les
parties)»].
Supprimer les références «ISO 835 (toutes les parties)», «ISO 8655-1», «ISO/TS 11333 (toutes les parties)»
et «ISO 16140» et ajouter les références suivantes.
ISO 835, Verrerie de laboratoire — Pipettes graduées
ISO 8655 (toutes les parties), Appareils volumétriques à piston
ISO/TS 11133 (toutes les parties), Microbiologie des aliments — Guide pour la préparation et la
production des milieux de culture
ISO 16140-2, Microbiologie des aliments — Validation des méthodes — Partie 2: Protocole pour la
validation de méthodes alternatives (brevetées) par rapport à une méthode de référence
Pages 7 à 32, Articles 5 et 6
Supprimer le texte existant et ajouter ce qui suit.
5 Appareillage et matériel
5.1 Généralités
Conformément à la bonne pratique de laboratoire, il est recommandé que tous les appareils et matériel soient propres et
en bon état de fonctionnement. Avant utilisation, il est recommandé de vérifier que le matériel est adapté à la finalité
prévue et de contrôler ses performances lors de son utilisation, le cas échéant.
Si nécessaire, il est recommandé d'étalonner le matériel et les dispositifs de surveillance à l'aide d'étalons nationaux
identifiés et de procéder au réétalonnage et à toutes vérifications intermédiaires avec des modes opératoires et des
résultats documentés.
Il est recommandé de vérifier et d'entretenir régulièrement le matériel afin de garantir son aptitude à l'emploi et la
sécurité. Il est recommandé de contrôler le matériel en fonction des conditions d'utilisation et de l'exactitude exigée par
les résultats.
Dans la plupart des cas, la fréquence d'étalonnage et de vérification de chaque pièce d'équipement n'est pas
mentionnée dans la présente Norme internationale, étant donné que cette fréquence doit être déterminée par
chaque laboratoire en fonction du type d'équipement, du niveau d'activité du laboratoire, ainsi que des
instructions du fabricant. Dans certains cas, et lorsqu'elle est considérée comme essentielle, la fréquence a
été spécifiée.
© ISO 2013 – Tous droits réservés 1

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ISO 7218:2007/Amd.1:2013(F)
L'appareillage et le matériel doivent être construits et installés de sorte à faciliter leur utilisation, entretien,
nettoyage, décontamination et étalonnage.
Toutes les incertitudes de mesure données dans le présent article correspondent à l'appareillage et à
l'équipement concernés, et non pas à l'ensemble de la méthode d'analyse.
Dans l'ensemble de cet article, des recommandations pour l'exactitude de l'appareillage de mesure sont
données. Celles-ci sont basées sur l’erreur pratique tolérée recommandée pour démontrer le contrôle
approprié du matériel de routine. L'exactitude indiquée est liée à l'incertitude métrologique du dispositif (se
référer au Guide ISO/CEI 99).
Pour le matériel possédant un contrôle de la température, vérifier la stabilité et l'homogénéité de la
température avant l'utilisation initiale et après toute réparation ou modification qui pourrait avoir un effet sur le
contrôle de la température.
5.2 Hottes de sécurité
5.2.1 Description
Une hotte de sécurité est un poste de travail à écoulement d'air laminaire horizontal ou vertical conçu pour
retirer de l'air la poussière et les autres particules, tels que les micro-organismes.
Le nombre maximal admissible de particules de dimension supérieure ou égale à 0,5 µm par mètre cube
correspond à la classe d'empoussièrement d'une hotte de sécurité. Pour les hottes utilisées en microbiologie
alimentaire, le nombre de particules ne doit pas dépasser 4 000 par mètre cube.
Les hottes utilisées dans les laboratoires de microbiologie alimentaire sont de quatre types.
a) Les hottes de sécurité biologique de classe I sont des hottes ouvertes sur le devant avec évacuation de
l'air, destinées à la protection de l'opérateur et de l'environnement mais qui ne protègent pas le produit
d'une contamination par l'environnement. Les aérosols potentiellement infectés sont contenus dans la
hotte et retenus sur le filtre par impaction. Généralement, l'air filtré est évacué dans l'atmosphère; si ce
n'est pas le cas, l'air doit passer à travers deux filtres HEPA (haute efficacité pour les particules de l’air)
montés en série. Lorsque les travaux impliquent des agents pathogènes appartenant au groupe de
risque 3, il est déconseillé d'utiliser ces hottes, en raison des difficultés à assurer la protection de
l'opérateur.
b) Les hottes de sécurité biologique de classe II protègent le produit, l'opérateur et l'environnement. Elles
font recirculer une quantité d'air filtré, évacuent une quantité d'air dans l'atmosphère qui est remplacée
par de l'air entrant par l'ouverture de travail, ce qui assure la protection de l'opérateur. Elles conviennent
pour un travail effectué avec des agents pathogènes des groupes de risque 2 et 3.
c) Les hottes à flux d'air laminaire horizontal protègent le travail de la contamination, mais expulsent tout
aérosol généré en direction du visage de l'opérateur. Par conséquent, elles ne conviennent pas à la
manipulation de cultures ensemencées ou à la préparation de cultures tissulaires.
d) Les hottes à flux d'air laminaire vertical protègent le produit en utilisant le flux d'air laminaire vertical
traversant le filtre HEPA. Elles protègent également l'opérateur grâce à la recirculation de l'air à l'intérieur.
Elles sont particulièrement indiquées pour créer un environnement aseptique approprié à la manipulation
de produits stériles et pour la protection de l'opérateur lors de la manipulation de poudres.
Utiliser des hottes de sécurité pour tout travail impliquant la manipulation d'agents pathogènes et de poudres
contaminées, si cela est requis par les réglementations nationales.
L'utilisation d'un brûleur à gaz ou d'un incinérateur à fil n'est pas recommandée dans les hottes de sécurité. Si nécessaire,
il est recommandé que le brûleur à gaz produise une petite flamme pour ne pas perturber le flux d'air. L'utilisation de
matériel à usage unique (anses, pipettes, etc.) constitue une alternative appropriée.
2 © ISO 2013 – Tous droits réservés

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ISO 7218:2007/Amd.1:2013(F)
5.2.2 Utilisation
Utiliser des hottes de sécurité adaptées aux conditions d'utilisation et aux conditions environnementales
propres au laboratoire.
Il est recommandé d'utiliser le moins de matériel possible à l'intérieur de la hotte.
Dans la mesure du possible, placer tous les éléments nécessaires à l'intérieur de la hotte avant de
commencer le travail, afin de réduire le plus possible les mouvements de bras à l'intérieur et à l'extérieur de
l'ouverture de travail. Placer le matériel et les accessoires de sorte à réduire le plus possible les perturbations
du flux d'air au niveau de l'ouverture de travail.
Il est recommandé que les opérateurs reçoivent une formation adaptée à l'utilisation correcte des hottes afin de garantir
leur sécurité et l'intégrité du produit ou de la culture.
5.2.3 Nettoyage et désinfection
Nettoyer et désinfecter la zone de travail après utilisation à l'aide d'un désinfectant approprié et non corrosif
selon les instructions du fabricant. Vérifier régulièrement les grilles de protection des préfiltres, le cas échéant,
et les nettoyer avec un tissu imprégné d'un désinfectant.
En ce qui concerne les hottes à flux laminaire, il est recommandé d'aspirer régulièrement la face du filtre en prenant soin
de ne pas endommager le matériau filtrant.
Il est recommandé de fumiger les hottes de sécurité avant de procéder au changement ou à l'entretien du filtre.
Après nettoyage des hottes, des lampes à ultraviolets (UV) peuvent être utilisées pour la désinfection. Il est recommandé
de nettoyer et de remplacer régulièrement les lampes UV, conformément aux instructions du fabricant. Si elles sont
utilisées, il est recommandé de les nettoyer régulièrement afin d'éliminer toute poussière et saleté susceptibles de bloquer
l'efficacité de la lumière UV à détruire les micro-organismes. Il est recommandé de vérifier l'intensité de la lumière
ultraviolette lorsque la hotte est contrôlée pour assurer que l'émission de lumière est conforme aux instructions du
fabricant.
Voir Référence [17].
5.2.4 Entretien et contrôle
Contrôler l'efficacité d'une hotte de sécurité lors de sa réception puis à intervalles réguliers, selon les
recommandations du fabricant, par une personne qualifiée ou certifiée et après toute réparation ou
modification. Il est recommandé de contrôler l'efficacité après un déplacement.
Il est recommandé de vérifier périodiquement l'absence de contaminations microbiennes par des contrôles de la surface
de la zone de travail et des parois de la hotte.
Il est recommandé de procéder à une vérification périodique du taux de micro-organismes présents dans l'air pendant le
fonctionnement des filtres en utilisant l'équipement approprié. Par exemple, exposer plusieurs boîtes de Petri ouvertes
contenant un milieu gélosé non sélectif (par exemple PCA) pendant 30 min dans chaque hotte. D'autres méthodes
peuvent également être utilisées.
5.3 Balances et diluteurs gravimétriques
5.3.1 Utilisation et incertitude de mesure
Les balances sont principalement utilisées pour peser la prise d'essai de l'échantillon à analyser et les
composants des milieux de culture et des réactifs. De plus, elles peuvent être utilisées pour peser la quantité
de diluant nécessaire.
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ISO 7218:2007/Amd.1:2013(F)
Les diluteurs gravimétriques sont des instruments électroniques, constitués d'une balance et d'un répartiteur
de liquide programmable. Ils sont utilisés pendant la préparation des suspensions mères des échantillons et
fonctionnent en ajoutant du diluant à une prise d’essai selon un rapport défini. La prise d’essai est pesée
selon l’erreur tolérée spécifiée par l'application et le diluteur est réglé pour délivrer suffisamment de diluant
pour le rapport requis (par exemple 9 à 1 pour les dilutions décimales). Voir l'ISO 6887-1.
Un laboratoire de microbiologie alimentaire doit être équipé de balances adaptées en portée et en incertitude
de mesure aux différents produits à peser.
Sauf spécification contraire, il est recommandé que la résolution de la balance permette une erreur de lecture tolérée de
1 %, mais elle doit être suffisante pour permettre une erreur maximale tolérée de 5 % sur la masse.
EXEMPLE Pour peser 10 g, il est recommandé que la balance permette une lecture à 0,1 g près.
Pour peser 1 g, il est recommandé que la balance permette une lecture à 0,01 g près.
Poser le matériel sur un support horizontal stable, ajusté si nécessaire de sorte à garantir une position plane
et à le protéger des vibrations et des courants d'air.
5.3.2 Nettoyage et désinfection
Il est recommandé de nettoyer et de désinfecter le matériel après utilisation ou à la suite d'un renversement de matières en
cours de pesée, à l'aide d'un désinfectant non corrosif approprié.
5.3.3 Vérification des performances et étalonnage
5.3.3.1 Étalonnage
L'étalonnage doit être vérifié sur l'ensemble du domaine de travail par une personne qualifiée à une fréquence
définie en fonction de l'utilisation.
5.3.3.2 Vérification
Les performances du système de pesage doivent être régulièrement vérifiées avec des masses de contrôle et
à l’intérieur de la plage d'utilisation, par une personne qualifiée, durant l'utilisation et après le nettoyage.
NOTE Les masses de contrôle peuvent également être vérifiées immédiatement après l'étalonnage de la balance.
5.4 Homogénéisateurs, mélangeurs et mixeurs
5.4.1 Description
Cet appareillage est utilisé pour préparer la suspension mère à partir de l'échantillon pour essai.
Il est possible d'utiliser l'un des appareils suivants:
 un mélangeur de type péristaltique avec des sacs stériles et comportant éventuellement un variateur de vitesse et un
minuteur; ou
NOTE Le Stomacher® est un exemple de produit approprié disponible sur le marché. Cette information est donnée à
l'intention des utilisateurs du présent document et ne signifie nullement que l'ISO approuve ou recommande l'emploi
exclusif du produit ainsi désigné.
 un homogénéisateur de type rotatif (blender), dont la vitesse théorique est comprise entre 8 000 r/min
et 45 000 r/min, équipé de bols stérilisables munis d'un couvercle; ou
 un homogénéisateur par vibrations avec des sacs stériles; ou
NOTE Le Pulsifier® est un exemple de produit approprié disponible sur le marché. Cette information est donnée à
l'intention des utilisateurs du présent document et ne signifie nullement que l'ISO approuve ou recommande l'emploi
exclusif du produit ainsi désigné.
4 © ISO 2013 – Tous droits réservés

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ISO 7218:2007/Amd.1:2013(F)
 un autre système d'homogénéisation d'efficacité équivalente.
Dans certains cas, le mélange manuel peut être réalisé en utilisant des billes de verre stériles de diamètre approprié
(environ 6 mm; voir l'ISO 6887-2 à l'ISO 6887-5).
5.4.2 Utilisation
La durée habituelle de fonctionnement d'un homogénéisateur péristaltique est comprise entre 1 min et 3 min
lors d'un essai (voir l'ISO 6887-2 à l'ISO 6887-5 pour des aliments spécifiques).
Ne pas utiliser ce type d'appareil pour certains produits alimentaires, tels que:
 les produits risquant d'entraîner des perforations du sac (présence de particules pointues, dures ou
sèches);
 les produits difficiles à homogénéiser de par leur texture (par exemple saucisson sec).
L'homogénéisateur rotatif doit fonctionner pendant une durée telle que le nombre total de tours soit compris
entre 15 000 r/min et 20 000 r/min inclus. Même avec l'homogénéisateur le plus lent, cette durée ne doit pas
dépasser 2,5 min.
Il est possible d'utiliser l'homogénéisateur par vibrations pour la plupart des produits alimentaires, y compris les produits
durs ou secs. La durée de fonctionnement habituelle est comprise entre 0,5 min et 1 min. Si des micro-organismes sont
susceptibles d'être présents au cœur de structures cohésives, il est recommandé de découper l'échantillon en petits
morceaux avant de le traiter.
Les billes de verre peuvent être utilisées pour la préparation, par agitation, des suspensions mères de certains produits
visqueux ou épais, notamment certains produits laitiers (voir les normes spécifiques).
5.4.3 Nettoyage et désinfection
Nettoyer et désinfecter régulièrement les homogénéisateurs péristaltiques et les homogénéisateurs par
vibrations, ainsi qu'à la suite de tout renversement de matière ou de toute fuite des sacs.
En ce qui concerne les homogénéisateurs rotatifs, nettoyer et stériliser les bols en verre ou en métal après
chaque utilisation.
5.4.4 Entretien
Contrôler et entretenir le matériel conformément aux instructions du fabricant.
5.5 pH-mètre
5.5.1 Description
Un pH-mètre est utilisé pour mesurer la différence de potentiel, à une température déterminée, entre une
électrode de mesure et une électrode de référence, toutes deux étant introduites dans le produit. Il doit
permettre une lecture à 0,01 unité pH près, pour être en mesure de réaliser des mesurages avec une erreur
tolérée de ± 0,1 unité pH. Le pH-mètre doit être équipé d'un système de compensation de température soit
manuel, soit automatique.
NOTE L'électrode de mesure et l'électrode de référence sont généralement réunies en un système d'électrodes combinées.
5.5.2 Utilisation
Un pH-mètre sert à mesurer la valeur du pH des milieux de culture et des réactifs pour vérifier si un
ajustement de cette valeur est nécessaire durant la préparation et fait office de contrôle qualité après la
stérilisation.
© ISO 2013 – Tous droits réservés 5

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ISO 7218:2007/Amd.1:2013(F)
Il peut également servir à mesurer la valeur du pH des échantillons et des suspensions échantillons. L'utilisation d'un pH-
mètre est mentionnée dans la norme spécifique du produit à analyser qui spécifie les conditions de la détermination de la
valeur du pH et de l'ajustement de la valeur du pH.
Ajuster le pH-mètre conformément aux indications du manuel du fabricant en vue de procéder à la mesure de
la valeur du pH à une température normalisée, par exemple 25 °C. Relever la valeur du pH après stabilisation.
Enregistrer la valeur à la seconde décimale près.
NOTE La lecture peut être considérée comme stable lorsque la valeur du pH mesuré sur une période de 5 s ne varie pas de plus
de 0,02 unité pH. En utilisant des électrodes en bon état, l'équilibre est normalement atteint dans les 30 s.
5.5.3 Étalonnage et vérification
5.5.3.1 Étalonnage
Étalonner le pH-mètre selon les instructions du fabricant, avec au moins deux, et de préférence trois,
solutions tampons étalon au moins chaque jour avant utilisation. Définir les erreurs maximales tolérées pour
ces lectures, qui doivent être plus strictes que l’erreur tolérée en utilisation générale.
Il est recommandé que les solutions étalons soient raccordées et la valeur de leur pH doit être spécifiée à la
seconde décimale près, à la température de mesure (en général pH 7,00 et pH 4,00 et/ou pH 9,00 à 25 °C,
conformément aux instructions du fabricant). Les solutions étalons utilisées doivent encadrer la valeur du pH
à mesurer.
5.5.3.2 Vérification
Après l'étalonnage du pH-mètre avec les deux solutions tampons étalon raccordées, il est recommandé d'utiliser une
troisième solution tampon étalon pour réaliser une lecture de vérification (en mode «lecture») pour démontrer la
fonctionnalité du pH-mètre.
Si les lectures se trouvent en dehors des erreurs maximales tolérées, régler le pH-mètre conformément aux
instructions du fabricant. Ce réglage doit être suivi d'un autre étalonnage et d'un autre contrôle.
5.5.4 Entretien
Vérifier et entretenir les électrodes selon les instructions du fabricant. Il est nécessaire, en particulier, de
surveiller régulièrement
 le vieillissement et l'encrassement des électrodes; et
 le temps de réponse et la stabilité.
Rincer les électrodes avec de l'eau distillée ou déionisée après chaque utilisation. Pour prévenir
l'encrassement et le vieillissement des électrodes, les nettoyer soigneusement et régulièrement,
conformément aux instructions du fabricant.
Conserver les électrodes selon les instructions du fabricant.
5.6 Autoclave
5.6.1 Description
Un autoclave permet d'obtenir une température en vapeur saturée dans la chambre.
Il est recommandé que l'autoclave soit muni
 d'au moins une soupape de sécurité;
6 © ISO 2013 – Tous droits réservés

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ISO 7218:2007/Amd.1:2013(F)
 d'un robinet de purge;
 d'un dispositif de régulation permettant le maintien de la température dans la chambre à  3 °C de la température
prévue (pour tenir compte de l'incertitude de mesure associée au thermocouple de mesure); et
 d'une sonde thermique ou d'un thermocouple enregistreur.
Il est recommandé également qu'il soit muni d'un minuteur et d'un thermomètre enregistreur.
5.6.2 Utilisation
Avec la stérilisation à la vapeur, tout l'air est expulsé avant la montée en pression. Si l'autoclave n'est pas
muni d'un dispositif d'évacuation automatique, il est nécessaire de le purger de son air jusqu'à émission d'un
jet continu de vapeur.
Pour la stérilisation des milieux de culture, la vapeur saturée dans la chambre doit être à une température
d'au moins 121 °C  3 °C ou à la température spécifiée par les instructions du fabricant ou de production ou
spécifiée dans la méthode d'essai.
Pour la destruction des micro-organismes cultivés et la décontamination des milieux de culture après
utilisation, la vapeur saturée dans la chambre doit être à une température d’au moins 121 °C  3 °C.
Au cours d'un même cycle de stérilisation, l'autoclave doit être utilisé soit pour stériliser le matériel propre
(et/ou les milieux de culture), soit pour décontaminer le matériel usagé (et/ou les milieux de culture utilisés),
mais pas les deux en même temps.
Il est préférable d'utiliser des autoclaves séparés pour ces deux processus. Après l'autoclavage, il est recommandé de
laisser refroidir tous les matériels et équipements avant de les retirer de l'autoclave.
Pour des raisons de sécurité, ne pas retirer le contenu tant que la température est supérieure à environ 80 °C.
5.6.3 Entretien
Nettoyer régulièrement la chambre, le filtre de vidange et les joints d'étanchéité de la porte. Vérifier l'intégrité
du joint d'étanchéité de la porte. Effectuer des opérations de vidange et de détartrage régulièrement, si
nécessaire. Suivre les recommandations du fabricant.
5.6.4 Vérification
L'autoclave doit être maintenu en parfait état de fonctionnement et doit être régulièrement contrôlé par du
personnel compétent selon les instructions du fabricant.
Maintenir les instruments de surveillance en bon état de fonctionnement et les vérifier par des étalonnages et
des contrôles réguliers.
Il est recommandé que la validation initiale comprenne des études de performance pour chaque cycle de fonctionnement
et chaque configuration de charge utilisée dans la pratique. Il est recommandé de répéter ce processus après toute
réparation ou modification significative. Il est recommandé de placer un nombre suffisant de sondes thermiques dans la
charge pour démontrer une pénétration de la chaleur adéquate en tous points de la charge. Il est recommandé que la
validation et la revalidation prennent en compte la pertinence des durées de mise en température et de refroidissement
ainsi que de la température de stérilisation.
Pour chaque charge, il est recommandé de placer au moins un indicateur du traitement thermique au centre de la charge
pour vérifier la montée en température lorsqu'il n'existe aucun enregistrement permettant d'effectuer la traçabilité de
l'efficacité du processus.
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5.7 Préparateur de milieux de culture
5.7.1 Description
Un préparateur de milieux de culture est principalement conçu pour la stérilisation de volumes importants de
milieux ( 1 l). Il est constitué d'un récipient pour la mise en température, d'une chemise d'eau et d'un
agitateur continu. Le matériel doit également être muni d'une jauge de température, d'un manomètre, d'un
minuteur et d'une soupape de sécurité.
De plus, il est recommandé que cet appareil soit muni d'un verrou de sécurité empêchant l'ouverture tant qu'une
température  80 °C n'est pas atteinte.
5.7.2 Utilisation
Toujours suivre les instructions du fabricant.
L'ensemble du processus de production a lieu au sein de l'appareil. Une fois que tous les ingrédients sont
ajoutés, ils sont dissous par agitation et chauffage, puis stérilisés.
5.7.3 Entretien
Laver et rincer soigneusement le préparateur avec de l'eau purifiée après chaque lot de milieux de culture.
5.7.4 Vérification
Le préparateur doit être maintenu en parfait état de fonctionnement et doit être régulièrement contrôlé par le
personnel compétent selon les instructions du fabricant.
Maintenir les instruments de surveillance en bon état de fonctionnement et les vérifier par des étalonnages et
des contrôles réguliers.
Il est recommandé que la validation initiale comprenne des études de performance pour chaque cycle de fonctionnement
et chaque type de charge utilisé dans la pratique. Il est recommandé de répéter ce processus après toute réparation ou
modification significative. Il est possible d'utiliser deux sondes thermiques, l'une étant placée à proximité de la sonde de
contrôle et l'autre étant éloignée de cette dernière, pour démontrer un chauffage uniforme.
Il est recommandé de vérifier la température et la durée de chaque cycle.
5.8 Étuve
5.8.1 Description
Une étuve consiste en une chambre calorifugée qui permet de maintenir une température stable et
uniformément répartie dans la limite des erreurs maximales de température tolérées, spécifiées dans la
méthode d'essai.
5.8.2 Utilisation
Les étuves doivent être équipées d'un système de régulation permettant de maintenir la température ou
d'autres paramètres uniformes et stables dans l'ensemble de leur volume utile. Définir le volume utile de sorte
à garantir l'uniformité et la stabilité de ces paramètres.
Si la température ambiante est proche de, ou supérieure à celle de l'étuve, il est nécessaire de munir la
chambre d'un système de refroidissement.
Il est recommandé de protéger les parois de l'étuve de la lumière solaire.
8 © ISO 2013 – Tous droits réservés

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ISO 7218:2007/Amd.1:2013(F)
Dans la mesure du possible, il est recommandé de ne pas remplir complètement l'étuve en une seule opération car le
temps de stabilisation de la température des milieux de culture sera long, quel que soit le type d'étuve utilisé (convection
d'air forcé ou autre). Éviter de laisser les portes de l'étuve ouvertes de manière prolongée.
Lors du chargement des étuves, il est recommandé de veiller à la circulation de l'air (voir 10.2.5).
5.8.3 Nettoyage et désinfection
Nettoyer et désinfecter régulièrement les parois intérieures et extérieures de l'étuve et, au besoin,
dépoussiérer le système de ventilation.
5.8.4 Vérification
Vérifier, dans l'ensemble du volume utile de l'étuve, la stabilité et l'homogénéité de la température, à la (aux)
température(s) de fonctionnement, en utilisant simultanément plusieurs thermomètres ou thermocouples,
ayant une exactitude connue et une plage de mesure suffisante.
Utiliser ces informations pour définir l'amplitude acceptable de températures de travail de l'étuve et la position
optimale du thermomètre ou du thermocouple enregistreur utilisé pour contrôler les températures de travail.
Par exemple, pour atteindre une température cible de (37 ± 1) °C quand les données de cartographie de l'étuve montrent
u
...

PROJET D'AMENDEMENT ISO 7218:2007/DAM 1
ISO/TC 34/SC 9 Secrétariat: AFNOR
Début de vote Vote clos le

2011-10-13 2012-03-13
INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION    МЕЖДУНАРОДНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ    ORGANISATION INTERNATIONALE DE NORMALISATION


Microbiologie des aliments — Exigences générales et
recommandations
AMENDEMENT 1
Microbiology of food and animal feeding stuffs — General requirements and guidance for microbiological
examinations
AMENDMENT 1
ICS 07.100.30




TRAITEMENT PARALLÈLE ISO/CEN
Le présent projet a été élaboré dans le cadre de l'Organisation internationale de normalisation (ISO) et
soumis selon le mode de collaboration sous la direction de l'ISO, tel que défini dans l'Accord de
Vienne.
Le projet est par conséquent soumis en parallèle aux comités membres de l'ISO et aux comités
membres du CEN pour enquête de cinq mois.
En cas d'acceptation de ce projet, un projet final, établi sur la base des observations reçues, sera
soumis en parallèle à un vote d'approbation de deux mois au sein de l'ISO et à un vote formel au sein
du CEN.

La présente version française de ce document correspond à la version anglaise qui a été
distribuée précédemment, conformément aux dispositions de la Résolution du Conseil 15/1993.

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secrétariat du comité. Le travail de rédaction et de composition de texte sera effectué au
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secretariat. ISO Central Secretariat work of editing and text composition will be undertaken at
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PEUT ETRE CITE COMME NORME INTERNATIONALE AVANT SA PUBLICATION EN TANT QUE TELLE.
OUTRE LE FAIT D'ETRE EXAMINES POUR ETABLIR S'ILS SONT ACCEPTABLES A DES FINS INDUSTRIELLES, TECHNOLOGIQUES ET
COMMERCIALES, AINSI QUE DU POINT DE VUE DES UTILISATEURS, LES PROJETS DE NORMES INTERNATIONALES DOIVENT PARFOIS ETRE
CONSIDERES DU POINT DE VUE DE LEUR POSSIBILITE DE DEVENIR DES NORMES POUVANT SERVIR DE REFERENCE DANS LA
REGLEMENTATION NATIONALE.
LES DESTINATAIRES DU PRÉSENT PROJET SONT INVITÉS À PRÉSENTER, AVEC LEURS OBSERVATIONS, NOTIFICATION DES DROITS DE PRO-
PRIÉTÉ DONT ILS AURAIENT ÉVENTUELLEMENT CONNAISSANCE ET À FOURNIR UNE DOCUMENTATION EXPLICATIVE.
©  Organisation Internationale de Normalisation, 2011

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ISO 7218:2007/DAM 1


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ISO 7218:2007/DAM 1
Sommaire Page
Avant-propos .vii
5 Appareillage et matériel.1
5.1 Généralités .1
5.2 Hottes de sécurité .2
5.2.1 Description.2
5.2.2 Utilisation .2
5.2.3 Nettoyage et désinfection.3
5.2.4 Entretien et contrôle.3
5.3 Balances et diluteurs gravimétriques .3
5.3.1 Utilisation et incertitude de mesure .3
5.3.2 Nettoyage et désinfection.4
5.3.3 Vérification des performances et étalonnage .4
5.4 Homogénéisateur, mélangeur et mixeurs.4
5.4.1 Description.4
5.4.2 Utilisation .4
5.4.3 Nettoyage et désinfection.5
5.4.4 Entretien .5
5.5 pH-mètre.5
5.5.1 Description.5
5.5.2 Utilisation .5
5.5.3 Vérification .5
5.5.4 Entretien .6
5.6 Autoclave .6
5.6.1 Description.6
5.6.2 Utilisation .6
5.6.3 Entretien .7
5.6.4 Vérification .7
5.7 Préparateur de milieux de culture .7
5.7.1 Description.7
5.7.2 Utilisation .7
5.7.3 Entretien .7
5.7.4 Vérification .7
5.8 Étuve.8
5.8.1 Description.8
5.8.2 Utilisation .8
5.8.3 Nettoyage et désinfection.8
5.8.4 Vérification .8
5.9 Réfrigérateur, chambre froide.9
5.9.1 Description.9
5.9.2 Utilisation .9
5.9.3 Vérification .9
5.9.4 Entretien et nettoyage.9
5.10 Congélateur et surgélateur.9
5.10.1 Description.9
5.10.2 Utilisation .10
5.10.3 Vérification .10
5.10.4 Entretien.10
© ISO 2011 – Tous droits réservés iii

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ISO 7218:2007/DAM 1
5.11 Bain thermostaté. 10
5.11.1 Description . 10
5.11.2 Utilisation. 11
5.11.3 Vérification . 11
5.11.4 Entretien. 11
5.12 Matériels produisant de la vapeur, y compris les bains d'eau bouillante . 12
5.12.1 Description . 12
5.12.2 Utilisation. 12
5.12.3 Entretien. 12
5.13 Four à stériliser. 12
5.13.1 Description . 12
5.13.2 Utilisation. 12
5.13.3 Vérification . 13
5.13.4 Entretien. 13
5.14 Four à micro-ondes . 13
5.14.1 Description . 13
5.14.2 Utilisation. 13
5.14.3 Vérification . 14
5.14.4 Entretien. 14
5.15 Lave-verrerie . 14
5.15.1 Description . 14
5.15.2 Utilisation. 14
5.15.3 Vérification . 14
5.15.4 Entretien. 14
5.16 Microscope optique. 15
5.16.1 Description . 15
5.16.2 Utilisation. 15
5.16.3 Entretien. 15
5.17 Brûleur à gaz ou incinérateur à fil. 15
5.17.1 Description . 15
5.17.2 Utilisation. 15
5.17.3 Entretien. 16
5.18 Répartiteur de milieux de culture et de réactifs . 16
5.18.1 Description . 16
5.18.2 Utilisation. 16
5.18.3 Vérification . 16
5.18.4 Nettoyage et entretien . 16
5.19 Agitateur vortex . 16
5.19.1 Description . 16
5.19.2 Utilisation. 17
5.19.3 Vérification . 17
5.19.4 Entretien. 17
5.20 Dispositif de comptage des colonies . 17
5.20.1 Description . 17
5.20.2 Utilisation. 17
5.20.3 Vérification . 17
5.20.4 Entretien. 17
5.21 Matériel pour culture en atmosphère modifiée. 18
5.21.1 Description . 18
5.21.2 Utilisation. 18
5.21.3 Vérification . 18
5.21.4 Entretien. 18
5.22 Centrifugeuse. 18
5.22.1 Description . 18
5.22.2 Utilisation. 18
5.22.3 Vérification . 19
5.22.4 Entretien. 19
iv © ISO 2011 – Tous droits réservés

---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 7218:2007/DAM 1
5.23 Plaque chauffante et chauffe-ballons.19
5.23.1 Description.19
5.23.2 Utilisation .19
5.23.3 Entretien.19
5.24 Ensemenceur spiral .19
5.24.1 Description.19
5.24.2 Utilisation .19
5.24.3 Vérification .20
5.24.4 Entretien.20
5.25 Distillateurs, déionisateurs et osmoseurs.20
5.25.1 Description.20
5.25.2 Utilisation .20
5.25.3 Vérification .20
5.25.4 Entretien.21
5.26 Minuteurs et minuteries.21
5.26.1 Description.21
5.26.2 Utilisation .21
5.26.3 Vérification .21
5.26.4 Entretien.21
5.27 Pipettes et pipetteurs.21
5.27.1 Description.21
5.27.2 Utilisation .21
5.27.3 Vérification .22
5.27.4 Entretien.22
5.28 Thermomètres et dispositifs de surveillance de la température, incluant les enregistreurs
automatiques .22
5.28.1 Description.22
5.28.2 Utilisation .22
5.28.3 Vérification .23
5.28.4 Entretien.23
5.29 Séparateur immunomagnétique .23
5.29.1 Description.23
5.29.2 Utilisation et vérification.24
5.29.3 Entretien.24
5.30 Système de filtration .24
5.31 Autres matériels et logiciels.24
6 Préparation de la verrerie et du matériel.24
6.1 Préparation.24
6.2 Stérilisation/décontamination .25
6.2.1 Généralités .25
6.2.2 Stérilisation par chaleur sèche .25
6.2.3 Stérilisation par chaleur humide (vapeur) .25
6.2.4 Décontamination à l'aide de composés chimiques .25
6.3 Matériel à usage unique.25
6.4 Stockage de la verrerie et du matériel.25
6.5 Gestion de la verrerie et du matériel stériles .25
6.6 Utilisation de la décontamination et de la désinfection .25
6.6.1 Décontamination du matériel à usage unique.25
6.6.2 Décontamination de la verrerie et du matériel avant leur utilisation .26
6.6.3 Décontamination de la verrerie et du matériel après utilisation .26
6.7 Gestion des déchets .26
6.8 Lavage .27
10 Dénombrement .27
10.1 Généralités .27
© ISO 2011 – Tous droits réservés v

---------------------- Page: 5 ----------------------
ISO 7218:2007/DAM 1
10.2 Dénombrement sur milieu solide. 27
10.2.1 Généralités . 27
10.2.2 Nombre de boîtes de Petri par dilution . 28
10.2.3 Techniques de dénombrement en profondeur. 28
10.2.4 Ensemencement en surface . 28
10.2.5 Incubation. 30
10.3 Calcul et expression des résultats sur milieu solide. 30
10.3.1 Dénombrement des colonies. 30
10.3.2 E
...