Meat and meat products — Enumeration of Brochothrix thermosphacta — Colony-count technique

Describes a method for the enumeration of viable Brochothrix thermosphacta in meat and meat products, including poultry, by means of a colony-count technique.

Viande et produits à base de viande — Dénombrement de Brochothrix thermosphacta — Technique par comptage des colonies obtenues

General Information

Status
Withdrawn
Publication Date
25-Dec-1996
Withdrawal Date
25-Dec-1996
Technical Committee
Current Stage
9599 - Withdrawal of International Standard
Completion Date
19-Jul-2017
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ISO 13722:1996 - Meat and meat products -- Enumeration of Brochothrix thermosphacta -- Colony-count technique
English language
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ISO 13722:1996 - Viande et produits a base de viande -- Dénombrement de Brochothrix thermosphacta -- Technique par comptage des colonies obtenues
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ISO 13722:1996 - Viande et produits a base de viande -- Dénombrement de Brochothrix thermosphacta -- Technique par comptage des colonies obtenues
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Standards Content (Sample)

INTERNATIONAL Is0
STANDARD 13722
First edition
1996-12-15
Meat and meat products - Enumeration
of Brochothrix thermosphacta -
Colony-count technique
Viande et produits 2 base de viande - Dhnombrement des Brochothrix
thermosphacta - Technique par comptage des colonies obtenues
Reference number
IS0 13722:1996(E)

---------------------- Page: 1 ----------------------
IS0 13722:1996(E)
Foreword
IS0 (the International Organization for Standardization) is a worldwide fed-
eration of national standards bodies (IS0 member bodies). The work of
preparing International Standards is normally carried out through IS0
technical committees. Each member body interested in a subject for
which a technical committee has been established has the right to be
represented on that committee. International organizations, governmental
and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. IS0
collaborates closely with the International Electrotechnical Commission
(I EC) on all matters of electrotechnical standardization.
Draft International Standards adopted by the technical committees are
circulated to the member bodies for voting. Publication as an International
Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting
a vote.
International Standard IS0 13722 was prepared by Technical Committee
lSO/lC 34, Agricultural food products, Subcommittee SC 6, Meat and
meat products.
Annex A of this International Standard is for information only.
0 IS0 1996
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be
reproduced or utilized in any form or by any means, electronic or mechanical, including
photocopying and microfilm, without permission in writing from the publisher.
International Organization
for Standardization
Case Postale 56 l CH-121 1 Geneve 20 l Switzerland
Printed in Switzerland
ii

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INTERNATIONAL STANDARD @ IS0 IS0 13722:1996(E)
Meat and meat products - Enumeration of Brochofhrix
thermosphacta - Colony-count technique
1 Scope
This International Standard specifies a method for the enumeration of viable Brochothrix thermosphacta in all kinds of
meat and meat products, including poultry, by means of a colony-count technique.
2 Normative references
The following standards contain provisions which, through reference in this text, constitute provisions of this
International Standard. At the time of publication, the editions indicated were valid. All standards are subject to
revision, and parties to agreements based on this International Standard are encouraged to investigate the pos-
sibility of applying the most recent editions of the standards indicated below. Members of IEC and IS0 maintain
registers of currently valid International Standards.
IS0 3100-2:1988, Meat and meat products - Sampling and preparation of test samples - Part 2: Preparation of
test samples for microbiological examination.
I SO 6887: 1993, Microbiology - General guidance for the preparation of dilutions for microbiological examination.
I SO 72 18: 1996, Microbiology of food and animal feeding stuffs - General rules for microbiological examinations.
3 Definition
For the purposes of this International Standard, the following definition applies.
3.1 Brochofhrix fhermosphacfa: Gram-positive bacteria which form characteristic oxidase-negative colonies on
a solid selective medium [streptomycin sulfate/thallium acetate/actidione (STAA) agar] under the test conditions
specified in this International Standard.
4 Principle
4.1 Surface plating, on a solid selective culture medium contained in Petri dishes, of a specified quantity of the
test sample if the initial product is liquid, or of a specified quantity of the initial suspension in the case of other
products.
1

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@ IS0
IS0 13722:1996(E)
Preparation of other plates, under the same conditions, using decimal dilutions of the test sample or of the initial
suspensron.
4.2 Incubation of the plates between 22 “C and 25 “C for 48 h + 4 h.
4.3 Subjection of the colonies to a confirmation test.
4.4 From the number of colonies confirmed, calculation of the number of Brochothrix thermosphacta per millilitre
or per gram of sample from colonies obtained on plates at dilution levels chosen so as to give the most reliable
result (see 9.3).
5 Dilution fluid, culture media and reagents
5.1 General
For current laboratory practice, see IS0 7218.
5.2 Dilution fluid
For the preparation of dilutions, see IS0 6887.
5.3 Solid selective medium: Streptomycin sulfate/thallium acetate/actidione (STAA) agar (see
reference [Z])
53.1 Base medium
53.1 .I Composition
Peptone
mo g
Yeast extract 28 g
Glycerol 1510 g
Dipotassium hydrogen phosphate (KzHPOb) I,0 g
Magnesium sulfate heptahydrate (MgS04-7H20) LO g
9 g to 18 91)
Agar
900 ml
Water
Depending on the gel strength of the agar.
I)
5.3.1.2 Preparation
Dissolve the components or the dehydrated complete medium in the water by boiling. Adjust the pH so that after
sterilization it is 7,0 at 25 “C.
Sterilize for 15 min in an autoclave (6.1) set at 121 “C.
2

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IS0 13722:1996(E)
@ IS0
5.3.2 Streptomycin sulfate solution
5.3.2.1 Composition
Streptomycin sulfate
I,0 g
100 ml
Water
5.3.2.2 Preparation
Dissolve the streptomycin sulfate in the water. Sterilize by filtration.
5.3.3 Actidione solution
WARNING - Actidione and thallium acetate are both toxic. Take appropriate procedures to prevent
contamination of the operator and the environment when using these chemicals and their solutions.
5.3.3.1 Composition
Actidione (cycloheximide) 150 mg
Water 90 ml
5.3.3.2 Preparation
Dissolve the actidione in the water. Sterilize by filtration.
5.3.4 Thallium acetate solution
5.3.4.1 Composition
Thallium acetate
Water
5.3.4.2 Preparation
Dissolve the thallium acetate in the water. Sterilize by filtration.
5.3.5 Complete medium
5.3.5.1 Composition
Base medium (5.3.1) 900 ml
Streptomycin sulfate solution (5.3.2) 50 ml
Actidione solution (5.3.3) 30 ml
20 ml
Thallium acetate solution (5.3.4)
5.3.5.2 Preparation
Melt the base medium and cool it in a water bath (6.9) set at 47 “C. Using sterile conditions, warm an aliquot of the other
liquids (5.3.2, 5.3.3 and 5.3.4) to 47 “C in the water bath. Add the stipulated volumes (5.3.5.1) of these solutions to the
cooled medium, mixing well between each addition.
3

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@ IS0
IS0 13722:1996(E)
5.3.6 Preparation of agar plates for enumeration
Pour 15 ml to 20 ml portions of the complete medium (5.3.5) into sterile Petri dishes (6.4) and allow to solidify.
The plates may be stored prior to drying at between 0 “C and 5 “C for up to 1 week.
Immediately before use, dry the agar plates, preferably with the lids removed and with the agar surfaces facing
downwards, in the incubator (6.2) set at a temperature between 37 “C and 50 OC, until the droplets have disappeared
from the surface of the medium. Do not dry them any further. The agar plates can also be dried in a drying cabinet for
30 min with half-open lids, or overnight with the lids in place.
Ready-prepared agar plates are available commercially. Store and use them according to the manufacturer ’s instructions.
5.4 Oxidase reagent
5.4.1 Composition
A/,/V,N~/V ’-Tetramethyl-pphenylenediamine dihydrochloride
I,0 g
100 ml
Distilled water
v
5.4.2 Preparation
Dissolve the reagent in the cold water. The reagent shall be prepared immediately prior to use.
Commercially available disks or sticks may be used. In this case, follow the manufacturer ’s recommendations.
6 Apparatus
Usual microbiological laboratory equipment and, in particular, the following.
6.1 Apparatus for dry sterilizing (oven) or wet sterilization (autoclave)
See IS0 7218.
6.2 Incubator or drying cabinet, ventilated by
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 13722
Première édition
1996-12-15
Viande et produits à base de viande -
Dénombrement des Brochothrix
thermosphacta - Technique par
comptage des colonies
Meat and meat products - fnumeration of Brochothrix thermosphacta -
Colon y-coun t technique
Numéro de référence
ISO 13722:1996(F)

---------------------- Page: 1 ----------------------
ISO 13722:1996(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de
I’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de I’ISO. Chaque comité membre intéressé par
une étude a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet.
Les organisations internationales,
gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO participent également aux
travaux. L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique
internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques
sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication comme
Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des co-
mités membres votants.
La Norme internationale ISO 13722 a été élaborée par le comité technique
lSO/K 34, Produits agricoles alimentaires, sous-comité SC 6, Viande et
produits à base de viande.
L’an nexe A de la présente Norme internationale est donnée uniquement à
titre d’information.
0 ISO 1996
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publi-
cation ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé,
électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l’accord écrit de
l’éditeur.
Organisation internationale de normalisation
Case postale 56 l CH-l 211 Genève 20 l Suisse
Imprimé en Suisse
ii

---------------------- Page: 2 ----------------------
ISO 13722:1996(F)
NORME INTERNATIONALE @ ISO
Viande et produits à base de viande - Dénombrement des
Brochothrix thermosphacta - Technique par comptage des
colonies
1 Domaine d’application
La présente Norme internationale prescrit une méthode pour le dénombrement des Brochothrix thermosphacta
présents dans tous les types de viande et produits à base de viande, y compris la volaille, par une technique de
comptage des colonies.
2 Références normatives
Les normes suivantes contiennent des dispositions qui, par suite de la référence qui en est faite, constituent des
dispositions valables pour la Norme internationale. Au moment de la publication, les éditions indiquées étaient en
vigueur. Toute norme est sujette à révision et les parties prenantes des accords fondés sur la présente Norme
internationale sont invitées à rechercher la possibilité d’appliquer les éditions les plus récentes des normes
indiquées ci-après. Les membres de la CEI et de I’ISO possèdent le registre des Normes internationales en
vigueur à un moment donné.
- Échantillonnage et préparation des échantillons pour
ISO 3100-2: 1988, Viandes et produits à base de viande
essai - Partie 2: Préparation des échantillons pour essai en vue de l’examen microbiologique.
I SO 6887: 1983, Microbiologie - Directives générales pour la préparation des dilutions en vue de l’examen
microbiologique.
I SO 72 18: 1996, Microbiologie des aliments - Règles générales pour les examens microbiologiques.
3 Définition
Pour les besoins de la présente Norme internationale, la définition suivante s’applique.
3.1 Brochothrix thermosphacta: Bactéries Gram-positives qui forment des colonies caractéristiques à réaction
oxydase négative sur un milieu sélectif solide gélosé au sulfate de streptomycine, acétate de thallium et actidione
(STAA) lorsque l’essai est effectué dans les conditions prescrites par la présente Norme internationale.
4 Principe
4.1 Ensemencement en surface sur un milieu de culture sélectif solide, coulé dans des boîtes de Petri avec une
quantité déterminée de l’échantillon pour essai si le produit à examiner est liquide, ou une quantité déterminée de
la suspension mère dans le cas d’autres produits.

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@ ISO
ISO 13722:1996(F)
Préparation d’autres boîtes, dans les mêmes conditions, en utilisant des dilutions décimales obtenues à partir de
l’échantillon pour essai ou de la suspension mère.
4.2 Incubation des boîtes entre 22 “C et 25 OC pendant 48 h + 4 h.
4.3 Soumission des colonies à un test de confirmation.
4.4 À partir du nombre de colonies confirmées, calcul du nombre de Brochothrix thermosphacta par millilitre ou
par gramme d’échantillon à partir des colonies obtenues sur les boîtes à des niveaux de dilutions choisis pour
donner le résultat le plus fiable (voir 9.3).
5 Diluants, milieux de culture et réactifs
5.1 Généralités
Pour les pratiques courantes de laboratoire, voir I’ISO 7218.
5.2 Diluants
Pour la préparation des dilutions, voir I’ISO 6887.
5.3 Milieu sélectif solide: gélose au sulfate de streptomycine, acétate de thallium et actidione
(STAA) (voir référence [2])
5.3.1 Milieu de base
5.3.1 .l Composition
Peptone mo 4
Extrait de levure 210 g
Glycérol 15,o 4
Monohydrogénophosphate de potassium (KzHP04) w g
Sulfate de magnésium heptahydrate (MgS04,7HzO) 110 g
9g à 18 91)
Agar-agar
900 ml
Eau
1) Selon le pouvoir gélifiant de I’agar-agar.
5.3.1.2 Préparation
Dissoudre les composants ou le milieu complet dans l’eau en portant à ébulition.
Ajouter le pH, de sot-te, qu’après stérilisation, il soit de 7,0 à 25 “C.
Stériliser pendant 15 min à l’autoclave (6.1) réglé à 121 “C.
2

---------------------- Page: 4 ----------------------
ISO 13722:1996(F)
Q ISO
5.3.2 Solution de sulfate de streptomycine
5.3.2.1 Composition
Sulfate de streptomycine w g
100 ml
Eau
I
I
5.3.2.2 Préparation
‘eau. Stériliser par filtration.
Dissoudre le sulfate de streptomycine dans I
5.3.3 Solution d’actidione
AVERTISSEMENT - L’actidione et l’acétate de thallium sont tous deux toxiques. Prendre les précautions
appropriées pour prévenir toute contamination de l’opérateur et de l’environnement lors de l’utilisation de ces
produits chimiques et de leurs solutions.
5.3.3.1 Composition
150 mg
Actidione (cycloheximide)
90 ml
Eau
I
5.3.3.2 Préparation
Dissoudre I’actidione dans l’eau. Stériliser par filtration.
5.3.4 Solution d’acétate de thallium
5.3.4.1 Composition
250 mg
Acétate de thallium
100 ml
Eau
5.3.4.2 Préparation
Dissoudre l’acétate de thallium dans l’eau. Stériliser par filtration.
5.3.5 Milieu complet
5.3.5.1 Composition
900 ml
Milieu de base (5.3.1)
50 ml
Solution de sulfate de streptomycine (5.3.2)
30 ml
Solution d’actidione (5.3.3)
20 ml
Solution d’acétate de thallium (5.3.4)
3

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ISO 13722:1996(F) @ ISO
5.3.5.2 Préparation
Faire fondre le milieu de base, puis le refroidir dans le bain d’eau (6.9) réglé à 47 “C. Dans des conditions stériles, chauffer
à 47 “C une portion aliquote des autres solutions (5.3.2, 5.3.3 et 5.3.4) dans le bain d’eau. Ajouter les volumes stipulés
(5.3.5.1) de chacune des solutions au milieu refroidi, en mélangeant bien entre chaque addition.
5.3.6 Préparation des boîtes de gélose pour le dénombrement
Couler le milieu complet (5.3.5) par quantités de 15 ml à 20 ml dans des boîtes de Petri stériles (6.4). Laisser se solidifier.
Les boîtes peuvent être conservées avant séchage entre 0 “C et 5 “C jusqu’à 1 semaine.
Immédiatement avant l’utilisation, sécher les boîtes de gélose, de préférence avec le couvercle enlevé et avec la surface
de la gélose tournée vers le bas, dans l’étuve (6.2) réglée entre 37 “C et 50 OC, jusqu’à disparition des gouttelettes à la
surface du milieu. Ne pas les sécher davantage. Le séchage des boîtes contenant le milieu de culture gélosé peut aussi
être réalisé sous hotte à flux laminaire pendant 30 min avec le couvercle entrouvert ou toute une nuit avec le couvercle
en place.
Des boîtes de Petri prêtes à l’emploi sont disponibles dans le commerce. Les conserver et les utiliser selon les
instructions du fabricant.
5.4 Réactif pour la recherche de l’oxydase
5.4.1 Composition
\
Dichlorhydrate de N,/V,N~WTétraméthyl-p-phénylène diamine
14 g
Eau distillée 100 ml
5.4.2 Préparation
Dissoudre le réactif dans de l’eau froide. Le réactif doit être préparé immédiatement avant utilisation.
Des disques ou des languettes du commerce peuvent être Utilisé(e)s. Dans ce cas, suivre les recommandations du
fabricant.
6 Appareillage
Matériel courant de laboratoire de micr
...

NORME ISO
INTERNATIONALE 13722
Première édition
1996-12-15
Viande et produits à base de viande -
Dénombrement des Brochothrix
thermosphacta - Technique par
comptage des colonies
Meat and meat products - fnumeration of Brochothrix thermosphacta -
Colon y-coun t technique
Numéro de référence
ISO 13722:1996(F)

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ISO 13722:1996(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération
mondiale d’organismes nationaux de normalisation (comités membres de
I’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de I’ISO. Chaque comité membre intéressé par
une étude a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet.
Les organisations internationales,
gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec I’ISO participent également aux
travaux. L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique
internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les projets de Normes internationales adoptés par les comités techniques
sont soumis aux comités membres pour vote. Leur publication comme
Normes internationales requiert l’approbation de 75 % au moins des co-
mités membres votants.
La Norme internationale ISO 13722 a été élaborée par le comité technique
lSO/K 34, Produits agricoles alimentaires, sous-comité SC 6, Viande et
produits à base de viande.
L’an nexe A de la présente Norme internationale est donnée uniquement à
titre d’information.
0 ISO 1996
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publi-
cation ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé,
électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l’accord écrit de
l’éditeur.
Organisation internationale de normalisation
Case postale 56 l CH-l 211 Genève 20 l Suisse
Imprimé en Suisse
ii

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ISO 13722:1996(F)
NORME INTERNATIONALE @ ISO
Viande et produits à base de viande - Dénombrement des
Brochothrix thermosphacta - Technique par comptage des
colonies
1 Domaine d’application
La présente Norme internationale prescrit une méthode pour le dénombrement des Brochothrix thermosphacta
présents dans tous les types de viande et produits à base de viande, y compris la volaille, par une technique de
comptage des colonies.
2 Références normatives
Les normes suivantes contiennent des dispositions qui, par suite de la référence qui en est faite, constituent des
dispositions valables pour la Norme internationale. Au moment de la publication, les éditions indiquées étaient en
vigueur. Toute norme est sujette à révision et les parties prenantes des accords fondés sur la présente Norme
internationale sont invitées à rechercher la possibilité d’appliquer les éditions les plus récentes des normes
indiquées ci-après. Les membres de la CEI et de I’ISO possèdent le registre des Normes internationales en
vigueur à un moment donné.
- Échantillonnage et préparation des échantillons pour
ISO 3100-2: 1988, Viandes et produits à base de viande
essai - Partie 2: Préparation des échantillons pour essai en vue de l’examen microbiologique.
I SO 6887: 1983, Microbiologie - Directives générales pour la préparation des dilutions en vue de l’examen
microbiologique.
I SO 72 18: 1996, Microbiologie des aliments - Règles générales pour les examens microbiologiques.
3 Définition
Pour les besoins de la présente Norme internationale, la définition suivante s’applique.
3.1 Brochothrix thermosphacta: Bactéries Gram-positives qui forment des colonies caractéristiques à réaction
oxydase négative sur un milieu sélectif solide gélosé au sulfate de streptomycine, acétate de thallium et actidione
(STAA) lorsque l’essai est effectué dans les conditions prescrites par la présente Norme internationale.
4 Principe
4.1 Ensemencement en surface sur un milieu de culture sélectif solide, coulé dans des boîtes de Petri avec une
quantité déterminée de l’échantillon pour essai si le produit à examiner est liquide, ou une quantité déterminée de
la suspension mère dans le cas d’autres produits.

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@ ISO
ISO 13722:1996(F)
Préparation d’autres boîtes, dans les mêmes conditions, en utilisant des dilutions décimales obtenues à partir de
l’échantillon pour essai ou de la suspension mère.
4.2 Incubation des boîtes entre 22 “C et 25 OC pendant 48 h + 4 h.
4.3 Soumission des colonies à un test de confirmation.
4.4 À partir du nombre de colonies confirmées, calcul du nombre de Brochothrix thermosphacta par millilitre ou
par gramme d’échantillon à partir des colonies obtenues sur les boîtes à des niveaux de dilutions choisis pour
donner le résultat le plus fiable (voir 9.3).
5 Diluants, milieux de culture et réactifs
5.1 Généralités
Pour les pratiques courantes de laboratoire, voir I’ISO 7218.
5.2 Diluants
Pour la préparation des dilutions, voir I’ISO 6887.
5.3 Milieu sélectif solide: gélose au sulfate de streptomycine, acétate de thallium et actidione
(STAA) (voir référence [2])
5.3.1 Milieu de base
5.3.1 .l Composition
Peptone mo 4
Extrait de levure 210 g
Glycérol 15,o 4
Monohydrogénophosphate de potassium (KzHP04) w g
Sulfate de magnésium heptahydrate (MgS04,7HzO) 110 g
9g à 18 91)
Agar-agar
900 ml
Eau
1) Selon le pouvoir gélifiant de I’agar-agar.
5.3.1.2 Préparation
Dissoudre les composants ou le milieu complet dans l’eau en portant à ébulition.
Ajouter le pH, de sot-te, qu’après stérilisation, il soit de 7,0 à 25 “C.
Stériliser pendant 15 min à l’autoclave (6.1) réglé à 121 “C.
2

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ISO 13722:1996(F)
Q ISO
5.3.2 Solution de sulfate de streptomycine
5.3.2.1 Composition
Sulfate de streptomycine w g
100 ml
Eau
I
I
5.3.2.2 Préparation
‘eau. Stériliser par filtration.
Dissoudre le sulfate de streptomycine dans I
5.3.3 Solution d’actidione
AVERTISSEMENT - L’actidione et l’acétate de thallium sont tous deux toxiques. Prendre les précautions
appropriées pour prévenir toute contamination de l’opérateur et de l’environnement lors de l’utilisation de ces
produits chimiques et de leurs solutions.
5.3.3.1 Composition
150 mg
Actidione (cycloheximide)
90 ml
Eau
I
5.3.3.2 Préparation
Dissoudre I’actidione dans l’eau. Stériliser par filtration.
5.3.4 Solution d’acétate de thallium
5.3.4.1 Composition
250 mg
Acétate de thallium
100 ml
Eau
5.3.4.2 Préparation
Dissoudre l’acétate de thallium dans l’eau. Stériliser par filtration.
5.3.5 Milieu complet
5.3.5.1 Composition
900 ml
Milieu de base (5.3.1)
50 ml
Solution de sulfate de streptomycine (5.3.2)
30 ml
Solution d’actidione (5.3.3)
20 ml
Solution d’acétate de thallium (5.3.4)
3

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ISO 13722:1996(F) @ ISO
5.3.5.2 Préparation
Faire fondre le milieu de base, puis le refroidir dans le bain d’eau (6.9) réglé à 47 “C. Dans des conditions stériles, chauffer
à 47 “C une portion aliquote des autres solutions (5.3.2, 5.3.3 et 5.3.4) dans le bain d’eau. Ajouter les volumes stipulés
(5.3.5.1) de chacune des solutions au milieu refroidi, en mélangeant bien entre chaque addition.
5.3.6 Préparation des boîtes de gélose pour le dénombrement
Couler le milieu complet (5.3.5) par quantités de 15 ml à 20 ml dans des boîtes de Petri stériles (6.4). Laisser se solidifier.
Les boîtes peuvent être conservées avant séchage entre 0 “C et 5 “C jusqu’à 1 semaine.
Immédiatement avant l’utilisation, sécher les boîtes de gélose, de préférence avec le couvercle enlevé et avec la surface
de la gélose tournée vers le bas, dans l’étuve (6.2) réglée entre 37 “C et 50 OC, jusqu’à disparition des gouttelettes à la
surface du milieu. Ne pas les sécher davantage. Le séchage des boîtes contenant le milieu de culture gélosé peut aussi
être réalisé sous hotte à flux laminaire pendant 30 min avec le couvercle entrouvert ou toute une nuit avec le couvercle
en place.
Des boîtes de Petri prêtes à l’emploi sont disponibles dans le commerce. Les conserver et les utiliser selon les
instructions du fabricant.
5.4 Réactif pour la recherche de l’oxydase
5.4.1 Composition
\
Dichlorhydrate de N,/V,N~WTétraméthyl-p-phénylène diamine
14 g
Eau distillée 100 ml
5.4.2 Préparation
Dissoudre le réactif dans de l’eau froide. Le réactif doit être préparé immédiatement avant utilisation.
Des disques ou des languettes du commerce peuvent être Utilisé(e)s. Dans ce cas, suivre les recommandations du
fabricant.
6 Appareillage
Matériel courant de laboratoire de micr
...

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